LNP(脂質(zhì)納米顆粒)相較于凍干技術(shù)在復(fù)雜程度上更高。LNP是由特定類(lèi)型的脂質(zhì)按照一定比例制成的納米結(jié)構(gòu)顆粒,通過(guò)明確的工藝組裝而成。在LNP的制備過(guò)程中,物理化學(xué)參數(shù)如顆粒大小、分散性以及適當(dāng)?shù)挠行幬锓庋b率非常重要,因?yàn)樗鼈冎苯佑绊懙?strong style="box-sizing: border-box;">LNP的生物學(xué)性能。這些參數(shù)必須在凍干過(guò)程和后續(xù)存儲(chǔ)中得以保留。
為了確保LNP的保存,選擇合適的凍干緩沖液、循環(huán)過(guò)程參數(shù)和溫度非常關(guān)鍵。這些因素能夠幫助維持LNP的穩(wěn)定性和活性,從而確保其在儲(chǔ)存期間不發(fā)生變化。因此,在制備和保存LNP時(shí),需要仔細(xì)考慮這些因素的選擇和控制,以確保其質(zhì)量和效果的穩(wěn)定性。
相關(guān)研究表明,含有小干擾(si) RNA或mRNA的LNPs可以成功地被凍干,但也有研究者發(fā)現(xiàn),siRNA-LNPs可以被凍干,但在用水復(fù)溶后,其功效(細(xì)胞培養(yǎng)中基因沉默效果)突出降低。
近的兩項(xiàng)研究表明,mRNA-LNP平臺(tái)可以被凍干。Zhao等人研究了編碼螢火蟲(chóng)熒光素的凍干mRNA-LNP,并通過(guò)小鼠體內(nèi)生物發(fā)光成像研究確認(rèn)了復(fù)溶后的產(chǎn)物維持了mRNA的表達(dá)效率。Hong等人開(kāi)發(fā)了一種凍干 SARS-CoV-2 mRNA-LNP 疫苗配方,并表明該疫苗可以在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)強(qiáng)烈的免疫應(yīng)答。